紫外分光光度計(jì)知識(shí)大全

　　紫外分光光度計(jì)*簡 介

　　紫外分光光度計(jì)是每個(gè)化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)室必備的常用儀器設(shè)備之一，適用于對(duì)紫外、可見光譜區(qū)域內(nèi)物質(zhì)的含量進(jìn)行定量和定性分析，可廣泛應(yīng)用于工廠、學(xué)校、冶金、農(nóng)業(yè)、食品、生化、環(huán)保、石油化工、醫(yī)療衛(wèi)生等單位的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)室。

　　紫外分光光度計(jì)*歷史發(fā)展

　　1852 年，比爾(Beer)參考了布給爾(Bouguer)1729 年和朗伯(Lambert)在 1760 年所發(fā)表的文章，提出了分光光度的基本定律，即液層厚度相等時(shí)，顏色的強(qiáng)度 與呈色溶液的濃度成比例，從而奠定了分光光度法的理論基礎(chǔ)，這就是**的朗伯比爾定律。1854 年，杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人將此理論應(yīng)用于定量分析化學(xué)領(lǐng)域，并且設(shè)計(jì)了**臺(tái)比色計(jì)。到 1918 年，美國國家標(biāo)準(zhǔn)局制成了**臺(tái)紫外可見分光光度計(jì)。此后，紫外可見分光光度計(jì)經(jīng)不斷改進(jìn)，又出現(xiàn)自動(dòng)記錄、自動(dòng)打印、數(shù)字顯示、微機(jī)控制等各種類型的儀器，使光度法的靈敏 度和準(zhǔn)確度也不斷 提高，其應(yīng)用范圍也不斷擴(kuò)大。 紫外可見分光光度法從問世 以來，在應(yīng)用方面有了很大的發(fā)展，尤其是在相關(guān)學(xué)科發(fā)展的基礎(chǔ)上，促使分光光度計(jì)儀器的不斷創(chuàng)新，功能更加齊全，使得光度法的應(yīng)用更拓寬了范圍。

　　紫外分光光度計(jì)*工作原理

　　紫外分光光度法定量測定的依據(jù)是比耳定律，即物質(zhì) 在一定濃度 的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比 。許多有機(jī)化合物在紫外區(qū)具有特征的吸收光譜，因此可用紫外分光光度法對(duì)有機(jī)物質(zhì)進(jìn)行定性鑒定，結(jié)構(gòu)分析及定量測定.其基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的有機(jī)物質(zhì)，引起分子中價(jià)電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。在紫外可見光的范圍內(nèi)，對(duì)于一個(gè)特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進(jìn)行定性分析，而且根據(jù)吸收與已知濃度的標(biāo)樣的比較，還能進(jìn)行定量分析。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸 收光譜研究物質(zhì) 的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。

　　紫外分光光度計(jì)*種 類

　　分光光度計(jì)從分光元件來講可分為棱鏡式和光柵式兩種，也有光柵加棱鏡的**分光光度計(jì)，現(xiàn)今的分光光度計(jì)大部分采用光柵分光。從結(jié)構(gòu)上來區(qū)分可分為單光束、準(zhǔn)雙光束、雙光束和雙波長分光光度計(jì)

　　紫外分光光度計(jì)*特 點(diǎn)

　　強(qiáng)勁的儀器性能：極其優(yōu)良的光學(xué)系統(tǒng)，先進(jìn)的電子學(xué)系統(tǒng)，高水準(zhǔn)的機(jī)械系統(tǒng)，保證了0.010%T的超低雜散光。

　　穩(wěn)定可靠的品質(zhì)：雙光束動(dòng)態(tài)反饋比例記錄測光系統(tǒng)保證了基線穩(wěn)定性。

　　氘燈、光電倍增管等關(guān)鍵器件均用進(jìn)口件，保證儀器的穩(wěn)定可靠和長壽命。

　　精準(zhǔn)的測量：采用進(jìn)口**全息光柵，進(jìn)一步降低儀器的雜散光，使儀器分析更加準(zhǔn)確。

　　輕松高效的人機(jī)對(duì)話：基于Windows環(huán)境設(shè)計(jì)的UVWin中文操作軟件，提供了豐富的儀器控制和操作功能，簡單易用，靈活高效，輕松滿足使用者的分析需求。

　　優(yōu)異的可擴(kuò)展性：有蠕動(dòng)進(jìn)樣器、超微量池架、恒溫池架、光學(xué)積分球、鏡面反射、光纖附件和比色皿系列等大量用戶可選專用附件，使儀器的應(yīng)用范圍大大擴(kuò)展。

　　設(shè)備維護(hù)簡單方便：獨(dú)特的插座式鎢燈和氘燈，換燈時(shí)免去光學(xué)調(diào)試，使設(shè)備儀器調(diào)試、維護(hù)更加簡單方便。

　　強(qiáng)大而便捷的軟件分析助手——UVWin5.0

　　先進(jìn)的Windows多文檔界面，UVWin5.0控制軟件，能夠?qū)崿F(xiàn)多模式同時(shí)顯示，測量方式切換瞬間完成。主體界面提供所有的功能，是用戶進(jìn)行軟件操作的基礎(chǔ)。包括：菜單、工具按鈕、測量模塊、狀態(tài)信息等。

　　◇ 四大常規(guī)測量功能

　　光度測量、定量測定、光譜掃描、時(shí)間掃描

　　◇ 三維譜圖功能

　　提供將多次測量的光譜曲線組合為三維圖形進(jìn)行顯示、編輯和打印的功能。

　　◇ DNA\蛋白質(zhì)測定功能

　　用戶可以利用此功能對(duì)DNA/蛋白質(zhì)進(jìn)行濃度測量，同時(shí)還可以設(shè)置不同分析方法，從而滿足不同的需要。

　　◇ 軟件遵循GLP規(guī)范

　　多用戶管理：允許管理員創(chuàng)建擁有不同權(quán)限的用戶和組;每個(gè)用戶登陸軟件需要輸入相應(yīng)的帳號(hào)和密碼;針對(duì)一般用戶可實(shí)現(xiàn)測量數(shù)據(jù)的保護(hù)功能。

　　日志記錄功能：自動(dòng)記錄用戶的操作;日志文件采用更為可靠的數(shù)據(jù)庫格式保存;管理員可對(duì)日志進(jìn)行分類查閱和其他處理。

　　二進(jìn)制文件保存：測量數(shù)據(jù)的保存格式采用二進(jìn)制格式;二進(jìn)制格式大大加強(qiáng)了數(shù)據(jù)的保密程度;同時(shí)也節(jié)省了磁盤空間。

　　質(zhì)量控制功能：可根據(jù)用戶的設(shè)置對(duì)測量數(shù)據(jù)進(jìn)行監(jiān)控;超出控制范圍的數(shù)據(jù)系統(tǒng)將會(huì)顯示提示信息、進(jìn)行顏色標(biāo)記或自動(dòng)重新測量。

　　報(bào)告輸出功能：可實(shí)現(xiàn)與其他系統(tǒng)共享數(shù)據(jù)的功能;可將測量結(jié)果保存為Microsoft Word格式、Microsoft Excel格式、文本文件格式;可對(duì)報(bào)告格式進(jìn)行個(gè)性化的設(shè)置;可提前預(yù)覽結(jié)果報(bào)告的打印效果。

　　高靈敏度-世界獨(dú)一無二的三檢測器系統(tǒng)：

　　安裝三個(gè)檢測器：光電倍增管用于紫外區(qū)和可見區(qū);InGaAs和PbS檢測器用于近紅外區(qū)。InGaAs檢測器覆蓋了光電倍增管和PbS檢測器的薄弱范圍，保證了整個(gè)測量范圍的高靈敏度。

　　高分辨率-寬測試范圍和超低雜散光：

　　采用高性能的雙單色器實(shí)現(xiàn)了超高的分辨率和超低的雜散光。測量范圍覆蓋紫外、可見和近紅外區(qū)域，滿足多種領(lǐng)域的測量要求。UVProbe實(shí)現(xiàn)了真正的QA/QC功能，完全支持GLP、GMP。另外還可以加載膜厚測定、色彩分析等軟件。

　　紫外分光光度計(jì)*技術(shù)參數(shù)

　　波長范圍：190 nm～1100 nm

　　光源：進(jìn)口鎢燈 進(jìn)口氘燈

　　光學(xué)系統(tǒng)：雙光束 1200 線平面光柵

　　透射比準(zhǔn)確度：±0.5%T

　　透射比重復(fù)性：±0.2%T

　　波長準(zhǔn)確度：≤±0.3 nm

　　波長重復(fù)性： ≤0.1 nm

　　雜散光 ≤0.05 %T (220 nm NaI 溶液)

　　光度范圍 -3 A～3 A

　　噪聲： ≤0.0003 Abs/h

　　基線平直度：≤±0.0005A

　　光譜帶寬：1nm

　　漂移：≤± 0.0004 Abs/h

　　光度準(zhǔn)確度 ±0.3 %T (0～100 %T)

　　光度重復(fù)性 0.001 Abs (0～0.5 Abs)

　　測量模式：透光率 吸光度 能量 反射率

　　顯示方式：通過連接 PC，方便您的存儲(chǔ)和操作方便

　　掃描方式：快 中 慢 三檔可調(diào)

　　波長及設(shè)置方式：任意設(shè)定

　　鍵盤：薄膜式按鍵

　　檢測器：進(jìn)口硅光電池

　　電源：AC 220V/50Hz 或 AC110V/60Hz

　　主機(jī)：重量 30kg 儀器尺寸：658*468*264

　　紫外分光光度計(jì)*應(yīng) 用

　　1 檢定物質(zhì)

　　根據(jù)吸收光譜圖上的一些特征吸收，特別是*大吸收波長雖 ax 和摩爾吸收系 數(shù)是檢定物質(zhì)的常用物理參數(shù)。這在藥物分析上就有著很廣泛的應(yīng)用。在國內(nèi)外 的藥典中，已將眾多的藥物紫外吸收光譜的*大吸收波長和吸收系數(shù)載入其中，為藥物分析提供了很好的手段。

　　2 與標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照

　　將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測 定紫外可見吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)完全一致。如果沒有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo) 準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密 度高，且測定條件要相同。

　　3 比較*大吸收波長吸收系數(shù)的一致性

　　4 純度檢驗(yàn)

　　5 推測化合物的分子結(jié)構(gòu)

　　6 氫鍵強(qiáng)度的測定

　　實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來 判斷化合物在不 同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑 。

　　7 絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定

　　8 反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究

　　9 在有機(jī)分析中的應(yīng)用有機(jī)分析是一門研究有機(jī)化合物的分離、鑒別及組成結(jié)構(gòu)測定的科學(xué)，它是 在有機(jī)化學(xué)和分析化學(xué)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的綜合性學(xué)科。

　　紫外分光光度計(jì)*用 途

　　紫外-可見光譜儀涉及的波長范圍是0.2--0.8微米(對(duì)應(yīng)波數(shù)50000-12500厘米-1)，它在有機(jī)化學(xué)研究中得到廣泛的應(yīng)用。通常用作物質(zhì)鑒定、純度檢查，有機(jī)分子結(jié)構(gòu)的研究。在定量方面，可測定結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的化合物和混合物中各組分的含量，也可以測定物質(zhì)的離解常數(shù)，絡(luò)合物的穩(wěn)定常數(shù)，物質(zhì)分子量鑒別和微量滴定中指示終點(diǎn)以及在高效液相色譜中作檢測器等。主要使用范圍是凡具有芳香環(huán)或共軛雙鍵結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，根據(jù)在特定吸收波長處所測得 的吸收度，可用于藥品的鑒別、純度檢查及含量測定。目前，廣泛應(yīng)用于冶金、機(jī)械、化工、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、生物化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、食品、 材料科學(xué)等領(lǐng)域的生產(chǎn)， 教學(xué)和科研工作中，

　　紫外分光光度計(jì)*選擇方法

　　我們?cè)谶x擇各種儀器時(shí)，都有一定的標(biāo)準(zhǔn)，如測量精度、或者測量范圍。而在選擇紫外分光光度計(jì)時(shí)，我們考慮的是光學(xué)構(gòu)造、光譜范圍、樣品類型和分析工具。

　　光學(xué)構(gòu)造主要是指紫外分光光度計(jì)給出的光是單光束還是雙光束。單光束是通過單束光進(jìn)行測量，在測量過程中給定波長，然后通過被測物和對(duì)照物得到吸光結(jié)果。而雙光束是通過一個(gè)斬光輪將光束一分為二。

　　光源包括紅外線、紫外線和可見光。鎢燈和鹵素?zé)粢话阒桓采w可見光部分(大約380 nm 到800 nm)。而氙燈則可以覆蓋紫外光和可見光區(qū)域。

　　分光光度計(jì)通常使用光電倍增管和光敏二極管來測量吸光值。

　　在大部分的樣品類型中，分光光度計(jì)可接受樣品孔、小玻璃管cuvette、吸漿管和微孔板。

　　大部分單機(jī)型的分光光度計(jì)包含了驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能的儀器，通常與PC機(jī)一起聯(lián)用，需要從制造商提供額外的軟件。同時(shí)用戶也可以選擇升級(jí)軟件以滿足他們的需要。

　　紫外分光光度計(jì)*檢驗(yàn)方法

　　一、波長準(zhǔn)確度的檢驗(yàn) 用干涉濾光片或鐠釹濾光片測量儀器的吸收峰值, 如果測出的值與濾光片標(biāo)準(zhǔn)值之差超出規(guī)程規(guī)定, 則需要進(jìn)行波長調(diào)節(jié)

　　二、 透射比正確度的檢驗(yàn) 用透射比標(biāo)準(zhǔn)值分別為10% 、20% 、30 %左右的光 譜中性濾光片, 可見光區(qū)分別在440、546、635nm 波長處,空氣為參比, 分別測量各濾光片的透射比, 紫外光區(qū)用重鉻酸鉀溶液分別在235 、257、313、 350nm 波長處, 以高氯酸溶液為參比, 測量其透射比。

　　三、穩(wěn)定度的檢驗(yàn) 在零點(diǎn)不受光的條件下, 用零點(diǎn)調(diào)節(jié)器將儀器調(diào)至零 點(diǎn), 觀察3 分鐘讀取透射比的變化, 即為零點(diǎn)穩(wěn)定性。 在儀器測量范圍兩端向中間靠10nm 處, 調(diào)節(jié)零點(diǎn)后, 蓋上樣品室蓋( 打開光門) , 使光電管受光, 調(diào)節(jié)透射 比為95% ( 數(shù)顯儀器調(diào)至100% ) 觀察3 分鐘讀取透 射比的變化, 即為光電流穩(wěn)定性。

　　四、 雜散光的檢驗(yàn) 可見分光計(jì)棱鏡式儀器在420nm 處, 光柵式儀器在 360nm 處, 紫外分光計(jì)在220nm 處分別用符合規(guī)定 的截止濾光片, 以空氣為參比, 測量其透射比值, 即為 儀器在相應(yīng)波長下的雜散輻射率

　　紫外分光光度計(jì)*操作方法

　　一、開機(jī)

　　開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，確認(rèn)電源是否連接。打開儀器電源開關(guān)，等待儀器自檢通過，自檢過程中禁止打開樣品室。

　　二、使用

　　自檢結(jié)束后(7個(gè)項(xiàng)目均出現(xiàn)ok字樣)，儀器進(jìn)入主菜單，屏幕顯示如下七個(gè)功能項(xiàng)：1.光度測量;2.光譜測量;3.定量測量;4.動(dòng)力學(xué)測量;5.數(shù)據(jù)處理;6.多波長測定;7.系統(tǒng)狀態(tài)設(shè)定。儀器經(jīng)30min熱穩(wěn)定后，就可以進(jìn)入正常測量。

　　1.光度測量 測定一定波長下的透光率(t%)或吸光度值(a)

　　在主菜單中選中[光度測量]項(xiàng)后，按[enter]鍵進(jìn)入此功能塊 → 按[goto wl]鍵進(jìn)入波長設(shè)置用數(shù)字鍵輸入你所需的波長值→ 按[enter]鍵確認(rèn)→ 屏幕提示：請(qǐng)稍等……，儀器自動(dòng)將波長移動(dòng)到你所需測定的波長值→ 按[f1]鍵，選擇測定透光率(t%)或吸光度值(a) → 打開樣品室蓋，將空白溶液和待測樣品分布放置比色皿架r位和s1位，關(guān)上樣品室蓋→ 按[f3]鍵，儀器自動(dòng)將比色皿架r位置移動(dòng)到光路中(即空白溶液)，屏幕上顯示cell=r → 按[auto zero]鍵，儀器自動(dòng)對(duì)空白溶液調(diào)零。屏幕提示：請(qǐng)稍等…… → 按[f2]鍵，比色皿架移動(dòng)到s1位 (待測樣品),屏幕上顯示cell=s1 → 按[f4]鍵測量t%或a值

　　測量完成后

　　1)打印輸出數(shù)據(jù)，按[start/stop]鍵

　　2)返回主菜單，按[mode]鍵

　　2. 光譜測量 波長掃描或光譜掃描，可直接測定一段波長范圍內(nèi)的光譜圖和峰值谷值數(shù)據(jù)

　　在主菜單中選中[光譜測量]項(xiàng)后，按[enter]鍵進(jìn)入此功能塊 → 根據(jù)需要設(shè)定測量模式、掃描范圍、記錄范圍、掃描速度、采樣間隔、掃描次數(shù)、顯示模式各參數(shù)。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向鍵到達(dá)設(shè)定行，進(jìn)行參數(shù)的修改，并按[enter]鍵確認(rèn) → 打開樣品室蓋，將空白溶液和待測樣品分布放置比色皿架r位和s1位，關(guān)上樣品室蓋→ 按[f3]鍵，儀器自動(dòng)將比色皿架r位置移動(dòng)到光路中(即空白溶液)，屏幕上顯示cell=r → 按[f1]鍵進(jìn)行基線校正。屏幕提示：基線校正…… → 按[f2]鍵，比色皿架移動(dòng)到s1位 (待測樣品),屏幕上顯示cell=s1 → 按[start/stop]鍵開始光譜掃描 → 屏幕顯示掃描圖譜

　　掃描結(jié)束后

　　1)打印結(jié)果譜圖，按[f4]鍵

　　2)直接讀取峰谷值，按[f2]鍵，屏幕??示“請(qǐng)輸入峰/谷檢測靈敏度”(默認(rèn)值為3)，按[enter]鍵確認(rèn)

　　3)存儲(chǔ)圖譜，獲取整個(gè)波長范圍內(nèi)的數(shù)據(jù)，按[f3]鍵，用[→]、[←]方向鍵選擇10個(gè)數(shù)字和26個(gè)字母組成文件名，按[enter]鍵確認(rèn)，按[f4]存儲(chǔ)，按1-8數(shù)字鍵確定文件序列號(hào)

　　4)修改譜圖坐標(biāo)范圍，按[f1]鍵。修改完畢后，按[start/stop]鍵確認(rèn)后，譜圖將按新設(shè)定坐標(biāo)被刷新

　　5)返回上**菜單，按[mode]鍵

　　3. 定量測定 建立濃度曲線，直接測定樣品的濃度

　　主菜單中選中[定量測定]項(xiàng)后，按[enter]鍵進(jìn)入此功能塊 → 根據(jù)需要設(shè)定測量波長、測量單位、測量方法各參數(shù)。按[→]、[←]、[↑]、[↓]方向鍵到達(dá)設(shè)定行，進(jìn)行參數(shù)的修改，并按[enter]鍵確認(rèn)

　　3.1 k系數(shù)法已知斜率k和截距b，測出樣品的吸光度值后待入公式就可算出濃度值

　　在測量方法中選擇k系數(shù)法，并按[enter]鍵確認(rèn) → 按[f2]鍵，將k值和b值輸入，按[enter]鍵確認(rèn) → 打開樣品室蓋，在當(dāng)前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋 → 按[auto zero]鍵調(diào)零 → 將樣品放入比色皿架中 → 按[start/stop]鍵進(jìn)入數(shù)據(jù)測量界面→ 按[f2]鍵移動(dòng)比色皿架，使被測樣品處于光路中 → 按[start/stop]鍵測量

　　3.2單點(diǎn)標(biāo)定法測量一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光度與坐標(biāo)零點(diǎn)建立工作曲線，測定未知樣品濃度

　　在測量方法中選擇單點(diǎn)標(biāo)定法，并按[enter]鍵確認(rèn) → 按[f2]鍵修改單點(diǎn) → 按數(shù)字鍵輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度值 → 按[enter]鍵→ 打開樣品室蓋，在當(dāng)前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋 → 按[auto zero]鍵調(diào)零 → 將空白樣品換成標(biāo)準(zhǔn)樣品→ 按[start/stop]鍵測量標(biāo)樣的吸光度并顯示 → 將樣品放入比色皿架中 → 按[start/stop]鍵進(jìn)入樣品測量界面 → 按[f2]鍵移動(dòng)比色皿架，使被測樣品處于光路中 → 按[start/stop]鍵測量

　　3.3多點(diǎn)標(biāo)定法測量已知濃度的一系列標(biāo)準(zhǔn)樣品吸光度，建立工作曲線來測定未知濃度

　　在測量方法中選擇多點(diǎn)標(biāo)定法，并按[enter]鍵確認(rèn) → 打開樣品室蓋，在當(dāng)前光路的比色皿架位中放入空白樣品，關(guān)上樣品室蓋 → 按[auto zero]鍵調(diào)零 → 按[f2]鍵重新標(biāo)定 → 按數(shù)字鍵輸入標(biāo)準(zhǔn)樣品數(shù) → 按[enter]鍵確認(rèn) → 將標(biāo)準(zhǔn)樣品依次放入比色皿架r、s1、s2位……關(guān)上樣品室蓋 → 按[f3]移動(dòng)比色皿架r位到光路 → 按[enter]鍵確認(rèn) → 按數(shù)字鍵輸入標(biāo)樣濃度值，按[enter]鍵確認(rèn) → 按[start/stop]鍵測量標(biāo)樣的吸光度→ 按[enter]鍵確認(rèn) → 按[f2]鍵移樣品位s1到光路，同樣的方法測量所有標(biāo)樣的吸光度 → 按[f1]鍵生成方程曲線，顯示該曲線的斜率k、截距b、相關(guān)系數(shù)r → 按[mode]鍵返回定量測量菜單 → 按[start/stop]鍵進(jìn)入數(shù)據(jù)測量菜單 → 放入樣品 →按[f2]鍵移動(dòng)比色皿架，使被測樣品處于光路中 → 按[start/stop]鍵測量

　　6.多波長測定 同時(shí)測定幾個(gè)波長下的透光率(t%)或吸光度值(a)

　　主菜單中選中[多波長測定]項(xiàng)后，按[enter]鍵進(jìn)入此功能塊 → 按[f3]鍵設(shè)定測量波長數(shù)目和樣品池個(gè)數(shù)，按[enter]鍵確定 → 按數(shù)字鍵輸入相應(yīng)波長值 → 打開樣品室蓋，將空白溶液和待測樣品分布放置比色皿架r、s1、s2位……，關(guān)上樣品室蓋 → 按[start/stop]鍵開始測量

　　測量完成后

　　1)打印輸出數(shù)據(jù)，按[f4]鍵

　　2)返回主菜單，按[mode]鍵

　　三、關(guān)機(jī)

　　將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開。

　　注意事項(xiàng)：

　　1.開機(jī)前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。

　　2.比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時(shí)應(yīng)保持比色皿清潔，池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時(shí)，需選用石英比色皿。

　　3.測定時(shí)，禁止將試劑或液體物質(zhì)放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因?qū)悠凡叟K，要盡可能及時(shí)清理干凈。

　　4.實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機(jī)溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi)，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認(rèn)可方可離開。

　　問題處理：

　　1、如果儀器不能初始化，關(guān)機(jī)重啟;如不成功，請(qǐng)向管理老師反映。

　　2、如果吸收值異常，依次檢查：波長設(shè)置是否正確(重新調(diào)整波長，并重新調(diào)零)、測量時(shí)是否調(diào)零(如被誤操作，重新調(diào)零)、比色皿是否用錯(cuò)(測定紫外波段時(shí)，要用石英比色皿)、樣品準(zhǔn)備是否有誤(如有誤，重新準(zhǔn)備樣品)。

　　紫外分光光度計(jì)*校正方法

　　1.波長 的 準(zhǔn)確度 試驗(yàn) 以儀 器 顯 示的 波長 數(shù) 值與 單 色 光的 實(shí)際 波 長值 之 間誤 差表示，應(yīng)在±1.0nm 范圍內(nèi)?？捎脙x器中氘燈的 486.02nm 與 656.10nm 譜線進(jìn)行 校正。

　　2.吸收度的準(zhǔn)確度試驗(yàn)

　　3.雜散光的試驗(yàn)

　　4.波長重現(xiàn)性試驗(yàn)

　　5.分辨率試驗(yàn)

　　紫外分光光度計(jì)*注意事項(xiàng)

　　1.儀器工作電壓一般為220V, 允許 10% 的電壓波動(dòng)。為保持 光源燈和檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性, 在電源電壓波動(dòng)較大的實(shí)驗(yàn)室*好配備穩(wěn)壓器。

　　2.一般供試品溶液的吸收度讀數(shù)，以在0.2～0.8之間的誤差較小。郎伯-比爾定律 只適用于稀溶液,太大了，A-C曲線已經(jīng)偏離了直線性，越大彎曲越嚴(yán)重，需要稀釋樣品。

　　3.拿比色皿時(shí)，手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。

　　4.測定有色溶液吸光度時(shí)，一定要用有色溶液洗比色皿內(nèi)壁幾次，以免改變有色 溶液的濃度。另外，在測定一系列溶液的吸光度時(shí)，通常都按由稀到濃的順序測 定，以減小測量誤差。

　　5.清洗比色皿時(shí)，一般先用水沖洗，再用蒸餾水洗凈。如比色皿被有機(jī)物沾污， 可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1∶2)浸泡片刻，再用水沖洗。不能用堿溶液或氧化 性強(qiáng)的洗滌液洗比色皿，以免損壞。也不能用毛刷清洗比色皿，以免損傷它的透光面。

　　6.每次做完實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細(xì)軟的吸水 紙吸干，以保護(hù)透光面。晾干后，放入吸收池盒中，防塵保存。

　　7.儀器的光柵、反射鏡**不能擦拭，否則將損壞儀器光學(xué)表面，增加雜散光。

　　8.為了延長光源使用壽命, 在不用時(shí)不用開光源燈。如果光源 燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定, 應(yīng)及時(shí)更換新燈。更換后要調(diào)節(jié)好燈絲位置, 不要用手直接接觸窗口或燈泡, 避免油污沾附, 若不小心接觸過, 要用無水乙醇以擦拭。

　　9.單色器是儀器的核心部分, 裝在密封盒內(nèi), 不能 拆開, 為防止色散元件受潮發(fā)霉, 必須經(jīng)常更換干燥劑。

　　10.必須正確使用吸收池, 保護(hù)吸收池光學(xué)面

　　11.光電轉(zhuǎn)換元件不能長時(shí)間曝光, 應(yīng)避免強(qiáng)光照射或受潮積塵。

　　紫外分光光度計(jì)*保養(yǎng)和維護(hù)方法

　　1.為了延長光源的使用壽命，在使用時(shí)應(yīng)盡量減 少開關(guān)次數(shù)，短時(shí)間工作間隔內(nèi)可以不關(guān)燈。 剛關(guān)閉的光源燈不要立即重新開啟。如果光源燈亮度明顯減弱或不穩(wěn)定，應(yīng)及時(shí)更換新燈。

　　2.要經(jīng)常更換單色器盒的干燥劑，防止色散元件受潮生霉。儀器停用期間，應(yīng)在樣品室和塑料儀器罩內(nèi)放置防潮硅膠，以免受潮，使反射鏡 面有霉點(diǎn)及沾污。同時(shí)選擇波長應(yīng)平衡地轉(zhuǎn)動(dòng)， 不可用力過猛。

　　3.正確使用吸收池，保護(hù)吸收池光學(xué)面。不能將光學(xué)面與手指、硬物或臟 物接觸，只能用擦鏡紙或絲綢擦拭光學(xué)面;不得在火焰或電爐上進(jìn)行加 熱或烘烤吸收池。生物樣品、膠體或其他在池體上易形成薄膜的物質(zhì)要用適當(dāng)?shù)娜軇┫礈?有色物質(zhì)污染，可用3mol/lHCL和·等體積乙醇的混合液洗滌。

　　4.電壓波動(dòng)較大時(shí)，要配備有過壓保護(hù)的穩(wěn)壓器。

　　5. 停止工作時(shí)，必須切斷電源，蓋上防塵罩。儀器若長期不用要定期通電 20—30分鐘。

　　6.首先在使用儀器前必須認(rèn)真閱讀儀器說明書用戶應(yīng)當(dāng)了解儀器的校正法如波長精度的校正光源燈的調(diào)整等在儀器使用說明書中都有詳細(xì)介紹儀器說明書應(yīng)當(dāng)妥善保存以便隨時(shí)查閱。

　　7.儀器必須設(shè)專人保管使用使用者應(yīng)熱知儀器各旋按鍵的功能和作用儀器使用前必須預(yù)熱5-30分鐘,預(yù)熱時(shí)除打開總電源開關(guān)和所選用的光源開關(guān)外應(yīng),同時(shí)將擋光桿退出光路使光電倍增管得到光照并調(diào)粗調(diào)旋鈕使數(shù)字電壓表在量 程旋鈕置腸檔時(shí)顯示接近100.0,這樣光電倍增管及負(fù)高壓 控制系統(tǒng)都進(jìn)入預(yù)熱狀態(tài),使卞時(shí)更加穩(wěn)定

　　8.預(yù)熱完畢,儀器進(jìn)入使用狀態(tài),將檔光桿推入光路,數(shù)字電壓表應(yīng)顯示0.00.否則可調(diào)儀器右側(cè)卜方調(diào)零旋鈕,使 數(shù)字電壓表顯示0.00允許誤差為末位士2個(gè)字,然后將 “參比”置于光路,調(diào)節(jié)粗調(diào)細(xì)調(diào)旋鈕,使數(shù)宇電壓表顯 示100.0,再將量程開關(guān)100百分之T檔轉(zhuǎn)換到0-2A檔，數(shù)字電壓表應(yīng)顯示0.000，允許誤差為士0.002.

　　9.如測試數(shù)據(jù)重復(fù)性不好，即同一樣由于某種原因使儀器外殼帶電，給人身和儀器帶來危害

　　10.對(duì)儀器工作環(huán)境的要求分光光度計(jì)應(yīng)安裝在穩(wěn)定的工作臺(tái)上, ( 周圍不應(yīng)有強(qiáng)磁場, 以防電磁干擾) , 室內(nèi)溫 度應(yīng)保持在( 10-30).室內(nèi)應(yīng)干燥, 相對(duì)濕度 宜控制在< 85% , 室內(nèi)應(yīng)無腐蝕性氣體, 光線不宜過強(qiáng)。

　　紫外分光光度計(jì)*故障分析與排除

　　故障現(xiàn)象一

　　儀器開機(jī)可見區(qū)(紫外區(qū))不顯示100.00，只顯 示0.000.引起此類故障的原因有1.鹵鎢燈( 氛 燈 )位置偏移,使光斑未能確地進(jìn)人人射狹縫 2.截止濾光片位置偏移。 對(duì)于前者,通過檢查可見(紫外光 )光斑人射 狹縫上的位置,重新調(diào)整鹵鎢燈 (氖燈) 裝 配位置加以排除!后者則可通過仔細(xì)調(diào)整光片 位置予以排除。

　　故障分析與排除

　　故障現(xiàn)象二

　　關(guān)上試樣室,開啟儀器(參照樣品為空氣 )儀器顯示為0.000 原因?yàn)榻刂篂V光片組旋轉(zhuǎn)位置( 偏移 )不正確。調(diào)整入等于 550nm時(shí)， 在凹面鏡為黃白相間各半光斑即可。

　　故障現(xiàn)象三

　　儀器開機(jī)全波長不顯示100.0，只顯示0.000 原因?yàn)?.單色器內(nèi)光柵脫落2.試樣槽位時(shí)落位不正確。前者可換 上光柵,后者則重新調(diào)整單色器內(nèi)光路使光斑正確經(jīng)出射縫進(jìn)人試 樣室,并用槽汝濾光片,采用逐點(diǎn)檢驗(yàn)波長以排除之。

　　常見故障排除

　　1 開機(jī)不工作且電源指示燈不亮 依次檢查電源線插頭、2A 保險(xiǎn)絲和電源開關(guān)是否完好, 若有損壞, 則予以 更換。

　　2 數(shù)據(jù)顯示不穩(wěn)定 確保預(yù)熱時(shí)間在30 min 以上、電源電壓為 220 V 且無突變。若儀器振動(dòng) 過大, 則應(yīng)重新定位安裝、調(diào)試。

　　3 吸光度溢出且顯示 E 2 或 ∀∀ ∀ ∀ 被測溶液濃度過大而導(dǎo)致吸光度溢出是正?，F(xiàn)象, 重新開機(jī)后一般會(huì)自動(dòng)消失。 檢查在吸光度擋時(shí)樣品室是否關(guān)閉, 否則應(yīng) 關(guān)閉樣品室。

　　4 能量不足且顯示 E 確認(rèn)試樣槽位置已固定好并且內(nèi)無異物, 然后觀察鎢燈是否點(diǎn)亮。重新調(diào)整鎢燈位置, 使其光斑聚集在狹縫正中。 用觀察法和替換法 , 確認(rèn)! 15 V 電源板和前置放大電路板完好后, 再檢查光路中濾光片、 ! , 反射鏡、 光柵、準(zhǔn)直鏡等是否臟污。若以上器件沾污, 應(yīng)戴上稱量專用手套, 小心清潔其表面。如果鏡面霉變, 需將其更換。更換時(shí)切勿用手接觸鏡面, 也不要對(duì)著鏡面講話, 以免鏡面被唾液污染。 用替換法檢查光電管是否完好。用手動(dòng)方法調(diào)整光路, 對(duì)常用波長 點(diǎn)逐一測試。把濾紙置于樣品室內(nèi)光路中, 檢測單色器輸出的各種單色光, 各波長的單色光均應(yīng)正確對(duì)應(yīng), 關(guān)閉樣品室后能夠調(diào)零。

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